Pirogen: Różnice pomiędzy wersjami

[wersja przejrzana][wersja przejrzana]
Usunięta treść Dodana treść
Wipur (dyskusja | edycje)
m plus interwiki
Zero (dyskusja | edycje)
m drobne redakcyjne
Linia 2:
 
== Pirogeny egzogenne ==
Wyróżniamy pirogeny egzogenne i endogenne. Najlepiej znanym pirogenem egzogennym jest '''[[Endotoksyny|endotoksyna]]''' [[bakterie|bakterii]] [[Bakterie Gram-ujemne|gram Gram-ujemnych]] ([[lipopolisacharyd]]). Wspólną cechą wszystkich pirogenów egzogennych jest to, że mają one na tyle dużą cząsteczkę, że nie mogą przenikać przez [[bariera krew-mózg|barierę krew-mózg]]. Pod ich wpływem dochodzi do uwolnienia pirogenów endogennych, endotoksyna wywołuje więc wzrost temperatury ciała działając pośrednio. Pirogeny wprowadzone do krwiobiegu powodują, poza gorączką, [[dreszcze]], bóle głowy, zaburzenia oddychania, [[leukopenia|leukopenię]] i [[leukocytoza|leukocytozę]]. W związku z tym leki do wstrzyknięć (podawane w objętości powyżej 15ml15 ml) muszą być wolne od pirogenów, czyli '''apirogenne'''.
 
Pirogeny egzogenne są ciepłotrwałe (termostabilne) w zwykłych warunkach wyjaławiania w [[autoklaw]]ie (nasyconą parą wodną w temperaturze 121&nbsp;°C, nadciśnieniu 101,4 kPa [[ciśnienie atmosferyczne|atm.]]) można je zniszczyć dopiero po 6-7h7&nbsp;h. Zwykły czas takiego zabiegu wynosi 20&nbsp;minut. Są wrażliwe na działanie takich substancji utleniających jak: [[Nadmanganian potasu|KMnO<sub>4</sub>]], [[nadtlenek wodoru|H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>]], [[podchloryn sodu|podchlorynu sodu]], mocnych [[Kwasy|kwasów]] i [[zasady|zasad]].
 
== Pirogeny endogenne ==
Linia 13:
 
=== Metoda biologiczna ===
Polega na wstrzyknięciu badanego roztworu do żyły brzeżnej ucha trzech, wyselekcjonowanych królików, w ilości 0,5-10 ml/kg masy ciała, w czasie 4&nbsp;min. Następnie mierzy się temperaturę ciała zwierząt. Należy zacząć mierzyć temperaturę ciała królików co najmniej 90&nbsp;minut przed podaniem roztworu badanego (w celu ustalenia temperatury początkowej) i kontynuować pomiary w odstępach 30&nbsp;-minutowych przez minimum 3h3&nbsp;h po podaniu (aby ustalić temperaturę maksymalną). Różnica między temperaturą początkową a maksymalną stanowi reakcję królika. Badany roztwór określa się jako wolny od pirogenów jeśli suma maksymalnych przyrostów temperatur nie przekracza 1,15&nbsp;°C, a gdy przekracza 2,65&nbsp;°C, produkt nie spełnia wymagań. Kiedy wyniki znajdują się pomiędzy tymi wartościami, test przeprowadza się dla kolejnej grupy 3 królików i oblicza sumę zmiany temperatury dla wszystkich 6 królików.
 
Wyniki ocenia się analogicznie, w razie konieczności powtarzając test dla następnych 3 królików. Przeprowadza się maksymalnie 4 serie badań, a ostatnia z nich daje wynik ostateczny.
Linia 55:
* wzorzec endotoksyny mianowany w jednostkach międzynarodowych – rozpuszcza się go w wodzie LAL, otrzymując w ten sposób roztwór macierzysty, z którego sporządza się roztwory do oznaczeń
* lizat amebocytów – przygotowany bezpośrednio przed użyciem
* woda LAL – woda do wstrzykiwań, która daje wynik ujemny w oznaczeniu endotoksyn, otrzymywana przez 3-krotnątrzykrotną destylację w układzie zamkniętym
* 0,1&nbsp;mol/l r.HCl i 0,1&nbsp;mol/l r. NaOH