Mikroskop dwufotonowy: Różnice pomiędzy wersjami

m
brak opisu edycji
m (lit., ort.)
m
Jak wspomniano, prawdopodobieństwo wzbudzenia fluoroforu przez dwa różne fotony jest niskie i zależne od kwadratu natężenia wiązki wzbudzającej. Jednak zapewnia to, że wzbudzenie nastąpi tylko w punkcie ogniskowania wiązek. Za pomocą zwierciadła skanującego można przesuwać punkt ogniskowania po płaszczyźnie ogniskowania i w ten sposób skanować daną płaszczyznę próbki. Przesuwając punkt ogniskowania w górę i w dół możemy także skanować trzeci wymiar. Dużą zaletą systemu dwufotonowego jest to, że używane do wzbudzania [[światło]] podczerwone, nie ulega rozpraszaniu tak silnie jak krótsze fale (co podnosi [[rozdzielczość]] obrazowania, ponadto ma ono lepszą zdolność do penetracji próbki (z drugiej strony fala dłuższe niż 1400nm są z kolei bardzo silnie pochłaniane przez [[woda|wodę]] obecną w preparatach). Dłuższa [[fala]] niesie także mniej [[energia|energii]], co obniża możliwe uszkodzenia powodowane przez światło poza płaszczyzną ogniskowania, przy przechodzeniu przez próbkę (fototoksyczność). Wadami systemu jest ich wysoka cena, na która wpływa konieczność stosowania drogiego lasera podczerwonego i dostosowanej do niego optyki. Także [[Widmo (spektroskopia)|widma]] absorpcji fluoroforów w systemie dwufotonowym różnią się od tych w systemie jednofotonowym, co często pociąga za sobą konieczność stosowania niestandardowych rozwiązań w tej kwestii.
 
==OdnośnikiBibliografia==
* Denk W, Strickler JH, Webb WW (1990) Two-photon laser scanning fluorescence microscopy. [http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=2321027&query_hl=10 Science. 1990 Apr 6;248(4951):73-6.]
 
* Denk W, Svoboda K (1997) Photon upmanship: why multiphoton imaging is more than a gimmick. [http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=9115730&query_hl=15 Neuron. 1997 Mar;18(3):351-7.]