Guarani byli przyjaźnie nastawieni do Hiszpanów, którzy przybyli na ich tereny w XVI wieku, pokazali im m.in. drogę do [[Peru]]<ref name="native2305"/>. W 1500 roku populacja Guarani liczyła ok. 1.5 miliona osób<ref name="Ganson18">{{Cytuj książkę | autor = Barbara Anne Ganson | tytuł = The Guaraní Under Spanish Rule in the Río de la Plata | wydawca = Stanford University Press | data = 2009 | strony = 18 | isbn = 9780804754958 | data dostępu = 2014-08-24 | url = http://books.google.be/books?id=CG7fscxlgpUC&printsec=frontcover#v=onepage&q&f=false}}</ref>. Guarani sąsiadowali z wrogo do nich nastawionymi plemionami i w kooperacji z Hiszpanami szukali korzyści militarnych i materialnych, plądrując u boku Hiszpanów ziemie [[Państwo Inków|Inków]]<ref name="native2305"/>. Hiszpańscy [[konkwista]]dorzy uważali ziemie Guarani ze wrota do legendarnej krainy [[El Dorado]]<ref name="native2305"/>.
Pod koniec XVI wieku na ziemie Guarani przybyli [[Jezuicijezuici]]<ref name="unesco1">{{Cytuj stronę | url = http://whc.unesco.org/archive/advisory_body_evaluation/648.pdf | tytuł = Advisory Body Evaluation | autor = UNESCO | język = en | data dostępu = 2014-08-19}}</ref>. Zakon szerzył [[chrześcijaństwo]] i działał na rzecz ochrony Indian przed systemem [[encomienda|encomiendy]] praktykowanym przez [[Hiszpania|hiszpańskich]] osadników<ref name="unesco1"/>, opartym początkowo na niewolniczej a później na pańszczyźnianej pracy ludności indiańskiej i prawie ściągania od Indian trybutu należnego koronie hiszpańskiej w zamian za opiekę. W 1609 roku Hiszpania nadała Jezuitomjezuitom ziemie w regionie granicznym Paragwaju, gdzie zakon założył 30 [[Redukcja misyjna|redukcji misyjnych]]: 8 na terenie obecnego Paragwaju, 13 w [[Argentyna|Argentynie]] i 7 w [[Brazylia|Brazylii]]<ref name="unesco1"/>. Guarani byli zachęcani do przyjmowania katolicyzmu i osiedlania się w redukcjach, przy czym nie byli poddawani europeizacji i zachowywali własne tradycje; Jezuicijezuici zachęcali ich do uprawy [[Ostrokrzew paragwajski|ostrokrzewu paragwajskiego]] do produkcji [[yerba mate]]<ref name="unesco">{{Cytuj stronę | url = http://whc.unesco.org/en/list/648/ | tytuł = Jesuit Missions of La Santísima Trinidad de Paraná and Jesús de Tavarangue | autor = UNESCO | język = en | data dostępu = 2014-08-19}}</ref>.
