Chemiczna synteza oligonukleotydów: Różnice pomiędzy wersjami

[wersja nieprzejrzana][wersja przejrzana]
Usunięta treść Dodana treść
Anulowanie wersji nr 14016775 autora 158.75.59.10
→‎Przebieg syntezy: drobne redakcyjne
Linia 27:
##odblokowanie grup ochronnych z zasad heterocyklicznych;
##odblokowanie reszty fosforanowej ([[Eliminacja (chemia)|β-eliminacja]] reszty cyjanoetylowej).
# W przypadku RNA dodatkowym etapem jest odblokowanie pozycji 2'-OH. zaGrupę pomocąsililową fluorkówusuwa (np.się zazwyczaj w warunkach zbliżonych do [[skala pH|obojętnych]] za pomocą fluorku tetrabutyloamoniowego, (TBAF) lub fluorowodorku trietyloamoniowego, (TEA•3HF).
# Oczyszczanie produktu za pomocą [[HPLC]] (jonowymiennej lub w fazie odwróconej) lub [[elektroforeza|elektroforezy]] (PAGE). Dla krótkich oligonukleotydów (kilka jednostek nukleotydowych) stosować można również [[TLC (chemia)|chromatografię cienkowarstwową]]<ref>E. Kierzek, R. Kierzek, W. N. Moss, S. M. Christensen, T. H. Eickbush, D. H. Turner. [http://nar.oxfordjournals.org/cgi/screenpdf/36/6/1770 Isoenergetic penta- and hexanucleotide microarray probing and chemical mapping provide a secondary structure model for an RNA element orchestrating R2 retrotransposon protein function]. [[Nucleic Acids Res.]] 36 (6):1770-1782, 2008. PMID 18252773. {{doi|10.1093/nar/gkm1085}}</ref>.
# [[Liofilizacja]] gotowego oligonukleotydu.