Bufor STE
Bufor STE – jeden z buforów wykorzystywanych w badaniach laboratoryjnych z dziedziny mikrobiologii oraz inżynierii genetycznej.
Skład buforu
edytujSkład mieszaniny nie jest ściśle ustalony, spotyka się różne warianty tego buforu zależnie od typu komórek, z których będzie w trakcie badań ekstrahowane DNA.
Przykładowa receptura stosowana do minilizy alkalicznej komórek bakteryjnych to:
Według jednej z procedur ekstrakcji DNA z komórek roślinnych receptura buforu STE to[1]:
- 0,25 M sacharoza,
- 0,03 M Tris,
- 0,05 M EDTA
Zastosowanie do ektrakcji DNA z komórek bakteryjnych
edytujBufor STE wykorzystywany jest do oczyszczania komórek bakteryjnych pochodzących z hodowli, w szczególności bezpośrednio przed izolacją plazmidowego DNA metodą minilizy alkalicznej. Po oddzieleniu komórek od mieszaniny pohodowlanej zawiesza się je w buforze STE i odwirowuje. Uzyskany supernatant usuwa się, a pellet poddaje procedurze izolacji plazmidowego DNA metodą minilizy alkalicznej.
Przypisy
edytuj- ↑ Takakura, KI., Nishio, T. Safer DNA extraction from plant tissues using sucrose buffer and glass fiber filter. „J Plant Res”. 125, s. 805–807, 2012-06-14. DOI: 10.1007/s10265-012-0502-x. (ang.).